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1、回答即可得2分,回答被采纳则获得悬赏分以及奖励20分 PCR 仪480使用标准操作流程发布时间:2007-8-9 浏览次数:153次原理:聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法,在微生物感染的诊断中具有重要的价值 。
2、在PCR扩增过程中,扩增的DNA产量是呈指数上升的,经过n个循环的扩增,一个DNA分子的产量便达到2n个拷贝 。
3、PCR产物一般为1013拷贝/ml,取0.1ml即为109拷贝,而1mg人基因组DNA才含1.4′106拷贝的单拷贝基因片段,因此使得PCR扩增反应具有强大的扩增能力,提高了检测的敏感性 。
4、此外,利用PCR反应,还能够对感染因子实施定量分析,实时监测其在宿主体内的动态变化,有利于指导临床诊疗 。
5、主体内容(操作步骤,必填项目):开启PCR仪电源至ON 位置;屏幕显示版本信息后,出现step to edit file# 3.SOAK file# 1的编辑:file# 1是在某一温度下持续无限长时间,即只可修改温度 。
6、按 file →1→Enter键;显示SOAK temperature (0-100) 25℃;可根据实验需要修改温度,如要30℃,按3,0,再按Enter键,显示End of file,RUN-STORE-PRINT, 按NO,使光标至store 的下方,按Enter 或yes键显示:File store Enter user# 选择自己的数码代号,按数字键盘后,按Enter键,显示: file store Enter file#选择空白程序号,按数字键盘,按Enter键,显示 Yes to store User # ××× file # ××× 按yes键,此号即为用户存储程序 。
7、Time delay File # 2 的编辑:Time delay file #是在某一温度下保温有限时间,按 file →2→Enter键,显示:Time delay File Step to edit file # 2 按step 键,显示 delay time (0-999) 7 min 0 sec 按要求修改后按enter键,调好min, sec后,显示beep while delay? NO- YES, 按NO→Enter,显示 link to a stored file, 若无需连接,按0→Enter, 按NO,让光标停留在store 下方,按Enter, 按自己的数码代号,按Enter, 按程序代号,按 yes (yes to store) 。
8、File # 3 的编辑:File # 3是温度循环,温度上升和下降比File # 4慢,编此程序大致同File # 4 。
9、File # 4的编辑:File # 4是程序循环,温度上升和下降快 。
10、按File → 4→Enter,显示 step- cycle file Step to edit File # 4, 按step, 显示:seg1 target temperature 94℃,如需修改则按数字键后,按enter, 否则直接按enter, 显示:seg1 segment time (0-999)1 min 0 sec 修改好min, sec 后,按enter,显示:seg2 target temperature 37℃ 温度时间修改方法同上,完成后按enter, 显示:seg3 target temp 72℃, 温度时间修改同上,seg 4 全部按0, 按 enter,显示:auto seg extension NO- YES, 按NO,显示:auto seg extension,NO- YES,按enter(step/yes) 回答 yes, 显示: extension per cycle (0-59)1 如果每个循环是延长1 sec, 按enter, 否则修改后按enter 键,显示:cycle count (1-99)25,修改后, 按 enter 键,显示 link to store file (0-99, 0= shut off) 0,若不与其它程序连接则按0,enter. 若与其它程序连接则按程序号,按enter, end of file RUN –STORE-PRINT 按NO,光标至 STORE 下方,按ENTER,显示: file store enter file # 按程序代码,按enter, 显示 yes to store User # ××× file # ×××按YES.清除程序按 file →所要清除的程序号→enter, 按file →clear, 显示 file # ×× deleted, enter new file #, 这样你所需要清除的程序被清楚,这一空白程序则可编入新程序 。
11、引用文献:本研究所操作规程和网上搜索 。
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