什么是电泳技术? 什么是电磁波( 二 )


2、例如 , 蛋白质分子是具有酸性基团(-COOH)和碱性基团(-NH2)的两性电解质 。在一定的溶液中 , 正负电荷相等 , 即分子的净电荷等于零 。此时蛋白质在电场中不再运动 , 溶液的pH值就是蛋白质的等电点(pI) 。如果溶液的pH值在等电点的酸性一侧 , 即pH & ltPL , 蛋白质带正电 , 在电场中移动到负极 。如果溶液的pH值在等电点的碱性一侧 , 即pH >0.001;PL , 蛋白质带负电 , 向正极移动 。溶液的pH值离pl越远 , 粒子的净电荷越多 , 电泳迁移率越大 。因此 , 在电泳时 , 应根据样品性质选择合适的pH缓冲液 。3.溶液的离子强度当电泳溶液中的离子浓度增加时 , 粒子迁移率降低 。原因是带电粒子吸引了相反符合的离子聚集在其周围 , 形成了与运动粒子相反符合的离子大气层 。离子大气不仅减少了粒子的带电量 , 还增加了粒子前进的阻力 , 甚至使其无法游动 。但如果离子浓度过低 , 缓冲液的总浓度和缓冲能力会降低 , 溶液的pH值难以维持 , 从而影响粒子的电荷 , 改变游泳速度 。离子的这种势垒效应与其浓度和价态有关 。它可以用离子强度I来表示.其中S代表溶液中离子的种类 , Ci和Zi分别代表每种离子的摩尔浓度和化合价 。最常见的I值在0.02到0.2之间 。电渗在电场作用下液体对固体支持物的相对运动称为电渗 。原因是固相支持体是多孔的 , 有可离解的化学基团 , 所以经常吸附溶液中的正离子或负离子 , 使溶液相对带负电或正电 。例如 , 当滤纸作为支撑物时 , 纸上的纤维素吸附带负电荷的OH- , 与纸接触的水溶液由于H3O向负极移动 。如果粒子在电场中向负极运动 , 则粒子的表现速度比其固有速度快;如果粒子移动到正极 , 则表现速度比其固有速度慢 。因此 , 可以看出 , 应尽可能选择低电渗的支架 , 以减少电渗的影响 。电泳分析的常用方法(1)醋酸纤维素薄膜电泳醋酸纤维素是由纤维素的羟基乙酰化形成的醋酸纤维素 。用这种物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜 。这种膜对蛋白质样品的吸附很小 , 几乎可以完全消除纸电泳中的“拖尾”现象 。由于其亲水性低 , 含有的缓冲液少 , 电泳时大部分电流由样品传导 , 所以分离速度快 , 电泳时间短 。
【什么是电泳技术? 什么是电磁波】