1. 国标GB19298 国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准 。两个标准方法在检测程序上略有不同 。
(一)国家标准:国家标准采用三步法 , 即:乳糖发酵试验、分离培养和证实试验 。
乳糖发酵试验:样品稀释后 , 选择三个稀释度 , 每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管 。36±1℃培养48±2h , 观察是否产气 。
分离培养:将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上 , 36±1℃培养18-24h , 观察菌落形态 。
证实试验:挑取平板上的可疑菌落 , 进行革兰氏染色观察 。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h , 观察产气情况 。
报告:根据证实为大肠杆菌阳性的管数 , 查MPN表 , 报告每1ml(g)大肠菌群的MPN值 。具体操作参见GB4789.3-2010《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定》
现行有效新国标:
(二)原国家商检局制订的行业标准 , 等效采用美国FDA的标准方法 , 用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测 。本方法采用两步法:
推测试验:样品稀释后 , 选择三个稀释度 , 每个稀释度接种三管LST肉汤 。36±1℃培养48±2h , 观察是否产气 。
证实试验:将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管中 , 36±1℃培养48±2h , 观察是否产气 。以BGLB产气为阳性 。查MPN表 , 报告每ml(g)样品中大肠菌群的MPN值 。
具体操作参见SN0169-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》
2. 大肠菌群检验程序+报告 化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测流程:
10g/mL样品+90mL灭菌生理盐水 →10mL+10mL双倍乳糖胆(含中和剂)培养基→粪大肠菌群 44.5℃ , 48h培养
注:在化妆品检测项目中 , 如果样品含有油脂性的成分 , 如精油 , 在样品前处理中需加入液体石蜡、吐温80、生理盐水进行均质 , 使样品能够均匀分散开来 。
粪大肠菌群又是一个什么样的微生物呢?下面我们来详细介绍下:
大肠菌群:大肠菌群并非细菌学分类命名 , 而是卫生细菌领域的用语 , 它不代表某一个或某一属细菌 , 而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌 , 这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致 。
定义(GB2010):在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌 。
粪大肠菌群:大肠菌群的一种 , 又称耐热大肠菌群 , 培养温度:44.5±0.5℃ , 粪大肠菌群是化妆品检测项目中必检的微生物项目 。
大肠埃希氏菌:((Escherichia. coli )通常称为大肠杆菌 。根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类:
致病性大肠杆菌(EPEC)、
肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、
肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、
肠出血性大肠杆菌(EHEC)、
肠黏附性大肠杆菌(EAEC) 。
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3. 大肠菌群检验程序+报告 化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测流程:10g/mL样品+90mL灭菌生理盐水 →10mL+10mL双倍乳糖胆(含中和剂)培养基→粪大肠菌群 44.5℃ , 48h培养注:在化妆品检测项目中 , 如果样品含有油脂性的成分 , 如精油 , 在样品前处理中需加入液体石蜡、吐温80、生理盐水进行均质 , 使样品能够均匀分散开来 。
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